上海起發(fā)生物科技有限公司（Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.）屬于上海起發(fā)實驗試劑有限公司（2009年成立）旗下的子公司，成立的初衷是建立上海起發(fā)生物自有品牌，打造國內z大，z全面，優(yōu)質的生物試劑民族自有品牌。降低成本的同時，把好生物產業(yè)鏈中的國產生物試劑品質關。經過近十余年的發(fā)展，公司逐漸形成了以生物醫(yī)藥研發(fā)，CRO，臨床診斷試劑產業(yè)為中心同時跨及農業(yè)，環(huán)保、化工，電子等多維度領域的生物試劑及相關原料供應商。產品涵蓋生化，蛋白質，分子生物學，細胞，動物，化工等諸多領域。

Biohub熱賣產品：

一、線性聚乙烯亞胺PEI MW40000

產品描述

BIOHUB 線性聚乙烯亞胺PEI MW40000 轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的產品，因其較高的轉染效果，已廣泛應用于AAV，LV和重組蛋白等工業(yè)化生產。

聚乙烯亞胺是一種具有較高陽離子電荷密度的有機大分子，每相隔兩個碳原子，即每第三個原子都是質子化的氨基氮原子，使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿"體(proton sponge)，因此，非常容易結合帶負電荷的核酸分子，形成帶正電荷的復合物顆粒，該顆粒與細胞表面陰離子結合，很容易通過內吞作用進入細胞；并且可抵御溶酶體的降解作用，從而提高核酸分子的表達水平。

基本信息

CAS

49553-93-7

分子式

(C2H5N)n . xHCl

分子量

40,000 (~22,000 free base)

熔點

73-75℃

溶解性

溶于冷水

不溶于

常用有機溶劑（乙醇、丙酮、四氫呋喃）

形式

白色固體粉末

生物毒性

未知

安全防護

手套，護目鏡，口罩

存儲

粉末至少可以保存一年， PEI內含自由氨基，建議開封后4℃干燥保存，減緩氧化過程。

運輸

常溫運輸

特點

大量實驗數據反饋，細胞通用性好，有非常好的轉染效果，尤其對293，CHO細胞系有特別顯著的轉染效果。

配置方法

PEI 轉染試劑粉末配置方法：

將 1g PEI MW40000 放入盛有 900 mL 水的玻璃燒杯中

放入攪拌轉子，放置于磁力攪拌器上，設置攪拌程序以形成一個較小的漩渦

等待 PEI MW40000 完q溶解，通常需要 5 分鐘左右

用 25 mL 塑料移液管加入 1 N NaOH 滴定至 pH 6.9~7.1

如果不小心超過 7.1，則使用 1N 的鹽酸和新的塑料移液管將 pH 重新滴定至 6.9~7.1

將溶液轉移到 1L 玻璃量筒中，加入水定容至 1L

用無菌真空過濾膜過濾配制的轉染試劑溶液

按需分裝，4°C 儲存

配置成液體后分裝在合適的瓶子中，并且保存在 4℃ 的轉染試劑將可在 6 個月之內保持性能。

如僅用于蛋白定性研究，分裝的轉染試劑可延長有效使用期至 1 年。

轉染操作流程：(貼壁細胞轉染方法)

1. 接種細胞： 轉染前一天，用膠原酶（BIOHUB Cat#78CL10002)消化細胞并計數（不建議用胰酶）。將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔加入的細胞量參考下圖表1，一般18-24小時（sf9細胞為3-4小時）后轉染。轉染時細胞匯合度應至少達到 70~80%以上。轉染前更換為含5%血清的生長培養(yǎng)基。

2. 準備 DNA-PEI 復合物： DNA、PEI 試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。用 Opti-MEM ITM或其他適合的無血清培養(yǎng)基稀釋適量 DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋 PEI 試劑。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 線性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有 DNA 溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置 10~25 min 以形成 DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如 NEST 5 mL /14 mL 離心管。 （稀釋PEI和DNA的體積為培養(yǎng)體積的1/10-1/20, DNA濃度為1ug/ml）

3. 轉染細胞： 直接向每個孔中加入 DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。轉染4-6小時（sf9細胞為2小時 )后，更換為生長培養(yǎng)基。

4. 孵育細胞和分析結果： 在 CO2培養(yǎng)箱中 37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后最快 7 h 即可檢測到轉入基因的表達。 請自行確定z適合檢測時間。

5. 轉染 24 h 后，將細胞傳代至新鮮的生長培養(yǎng)基中（將細胞稀釋 10 倍 以上），在 CO2培養(yǎng)箱中 37℃孵育過夜。第二天加入與轉染抗性基因相匹配的篩選藥物。約 1~2 周可 篩選到耐藥性克隆，在這期間需經常更換含篩選藥物的生長培養(yǎng)基。

轉染操作流程：(懸浮細胞轉染方法)

1. 轉染前準備：懸浮細胞傳代接種于適量含懸浮細胞生長培養(yǎng)基中，合適條件下培養(yǎng)。根據培養(yǎng)瓶大小調整細胞密度（例100mL培養(yǎng)瓶，1X10 6 cells/mL），然后旋緊瓶口放入搖床繼續(xù)培養(yǎng)，2~4小時后可以進行轉染。

2. 準備 DNA-PEI 復合物：DNA、PEI 試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室。用 Opti-MEM ITM或其他適合的無血清培養(yǎng)基稀釋適量 DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋 PEI 試劑。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 線性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有 DNA 溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置 10~25 min 以形成 DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如 NEST 5 mL /14 mL 離心管。

3. 轉染細胞：將PEI-DNA轉染復合物逐滴加入到細胞培養(yǎng)液中，搖勻后旋緊瓶口放回搖床合適培養(yǎng)條件下培養(yǎng)至可以分析檢測。

4. 孵育細胞和分析結果：轉染后一般24-72h即可檢測到轉入基因的表達。 請自行確定z適合檢測時間。

5. 如果要獲得更多的蛋白產量，有文獻表明轉染后24小時，可以適當稀釋細胞，稀釋比例參考范圍（1:2—1:5）之間，可以增加蛋白產量，稀釋效應與最佳稀釋比率應根據經驗確定。

產品背景

BIOHUB 生產的78Bio PEI是一種優(yōu)化的線性陽離子聚合物轉染試劑,分子量分別為 25000 和 40000，78BioPEI40000 相比 25000 轉染效率高，但毒性也略大于 78PIE25000。在 HEK293 和 CHO 的蛋白表達系統中，相比于市面上的脂質體 78BioPEI 都表現出高的蛋白表達量（無 論是 96 孔板還是 100L 的細胞反應器），以及更小的細胞毒性、更高的轉染效和更高的可 重復性，并且十分經濟的高性價比轉染試劑。產品具有以下特點：

1.轉染效率高，細胞毒性低；  蛋白表達量高；

2.節(jié)約成本：BIOHUB 78 PEI轉染試劑 ，進口品質，親民價格，至少能夠降 40% 的轉染試劑總成本；

3.適用于 HEK293 等真核細胞的轉染；

4.適用于貼壁細胞和懸浮細胞的轉染；

5.適用于有血清和無血清的轉染條件；

6. 無機試劑，無動物源成分；

7. 產品穩(wěn)定，質控嚴格；

8. 工藝流程適用范圍廣，容易優(yōu)化 適合小規(guī)模培養(yǎng)板，培養(yǎng)瓶到大規(guī)模的生物反應器。

產品反饋

注意事項

1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2. 本產品主要用于科研領域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

3.加熱或加酸都有助于 78BioPEI 溶解。當然酸可能不用加那么多，詳細用量可試加一點 ,攪拌看看，足夠溶解就行，不一定需要加到 pH 那么低。

4.一定要溶解充分，溶解不充分會影響后續(xù)的轉染效率.

5.冷凍后可能會影響其后續(xù)轉染效果。

特別提醒：初次使用 78PEI 進行不同基因轉染時應先做預試，優(yōu)化出適合自己實驗的， 最佳 PEI 和 DNA 的比例，通常篩選范圍在 1:1 到 5:1 之間，如果之前用過Polysciences品牌的 PEI，用 78BioPEI 時應適當降低使用濃度。

二、蛋白快速染色液

簡介

一種特殊配方的考馬斯亮藍染液，只染蛋白不染膠。無刺激性氣味高度環(huán)保，可用于ＳＤＳ-ＰＡＧＥ或非變性ＰＡＧＥ等蛋白電泳膠的快速、高靈敏染色，或Western轉膜后PAGE膠上殘余蛋白的檢測。對于 1.0 mm 厚度的凝膠，染色過程僅需15分鐘，就可以檢測到低達20ng的蛋白電泳條帶，若實驗對檢測靈敏度有較高要求，可將凝膠放置在染色液中2小時，可達到最大靈敏度(BSA：7ng)。

l 無需固定，微波或脫色，最快10min可觀測到蛋白條帶

l 高靈敏度 檢測下限可達7ng

l 背景清晰 過夜也不會染色過度

l 經濟安全 每塊膠僅需25ml染色液

l 質譜兼容 不會使蛋白甲基化或乙酰化

推薦用法

1. 電泳后的SDS-PAGE 膠取下放入容器中，加入25 ml本染色液（適用于8cm*8cm*1.5mm SDS-PAGE凝膠，按實際大小酌情增減，調整范圍30-50ml）。

2. 置于搖床上搖動，2-5min 后條帶開始顯現，1h后可見背景清晰細小條帶，染色時間可根據膠類型和檢測蛋白調整（40min -過夜）均可。背景顏色基本不會隨染色時間增強。

3. 染色結束后，將蛋白凝膠至于水中保存及取出拍照。因蛋白等電點不同，染料瞬時附著能力不同，建議染色 2h 以后，或者過夜，再將凝膠放入水中效果更佳。

4. 染液可以重復利用 2-3 次。隨使用次數的增加，需增加染色時間。

基本參數

常見問題

注意事項

1. 染色液放置一段時間瓶底會有沉淀，使用之前請上下顛倒混勻。

2. 本染色液呈酸性，有輕微腐蝕性，使用時請作必要防護。

3. 需自備去離子水或雙蒸水。

4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

5. 本產品主要用于科研領域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

三、優(yōu)級胎牛血清 Fetal Bovine Serum（FBS, Superfine）

產品描述

胎牛血清(優(yōu)級)具有j格優(yōu)惠、性價比高的特點，來源清晰。適用于多種細胞的培養(yǎng)，如大多數動物器官細胞的培養(yǎng)，腫瘤細胞和癌細胞的培養(yǎng)，以及部分融合細胞的實驗和培養(yǎng)。它還可用于細胞系的保存和組織器官的培養(yǎng)、單克隆抗體的研制、絕大多數腫瘤細胞的培養(yǎng)，也可用于少數干細胞的培養(yǎng)，如脂肪干細胞。由于其自身的特點，該產品已成為公司銷量z大的產品。此材料來源于美國農業(yè)部認證的原料，和我們其他等級的原料一樣經過同樣的過濾方案和最終的質量控制測試。這種胎牛血清通過100nm (0.1 mm)孔徑分級過濾器進行過濾。在分裝之前，每批血清使用真池技術進行混合，以確保各瓶之間的均勻性和一致性。

產品特點

低內毒素，無細菌，支原體，噬菌體，病毒等污染;

無外源添加因子，不含技術，抗生素等；

產品應用

已通過本公司300多種細胞株和上百種原代細胞的驗證，細胞生長速度快，狀態(tài)良好。

運輸與保存方法

干冰運輸，-20°C凍存。

注意事項

請在2°C-8°C的環(huán)境中解凍，不宜在較高溫度下進行解凍；注意：解凍溫度較高會導致血清渾濁，沉淀增加，品質下降，

血清解凍過程中請不時搖勻（小心勿造成氣泡），使血清成分和溫度均勻，從而減少沉淀的產生。

血清解凍后應盡快用完，盡量避免反復凍融。

血清不宜在是室溫中長時間放置，使用后盡快放回2°C-8°C中。

高溫解凍，舉例搖晃，反復凍融，放置時間過長等，請勿超過一個月。

四、ACCUTASE™ 細胞消化液

產品簡介

Accutase™是包含蛋白水解酶和膠原酶活性的一種細胞消化液，是胰酶/EDTA消化液的w美替換產品，用于從常規(guī)組織培養(yǎng)器皿和粘附培養(yǎng)器皿中消化細胞。適用于組織解離和細胞分離，因分離后的細胞能保持完好的表面抗原，且不含任何動物動物或者細菌來源組分，可滿足對后續(xù)如細胞表面標記、病毒生長分析、流式細胞分析以及生物反應器相關檢測等多種實驗的要求。

與傳統的胰酶消化液相比，本品具有以下優(yōu)勢：

1）適用于絕大多數原代細胞和哺乳動物細胞系的消化，以及昆蟲細胞；

2）溫和有效的消化干細胞（hESCs和mESCs），凍存后細胞具更高復蘇率；

3）幾分鐘內實現粘附細胞的分離，不需清洗或中和反應，節(jié)省細胞傳代時間；

4）對細胞消化較為溫和，能增加細胞產量和存活率；增強細胞貼壁效率；改善細胞形態(tài)和細胞生長特性等。

本品為即用型的無菌產品，溶于Dulbecco’s PBS（含0.5 mM EDTA和3 mg/L酚紅），酶活性≥ 200 U/mL，可直接用于細胞培養(yǎng)相關實驗。使用說明

1. 4 ℃或冰浴融解Accutase，之后進行分裝保存。

【注】：不可37 ℃融化本品，否則會影響酶活。

2. 使用不含鈣、鎂的1×Dulbecco's PBS潤洗細胞一次；

3. 以無菌操作的方式，按 75 cm2表面積加入10 mL的Accutase覆蓋貼壁細胞；

4. 重新放入37 ℃培養(yǎng)箱內，消化5-10 min；

【注】：消化時間可自行調整。大部分細胞處于Accutase中高達1小時，對細胞狀態(tài)無影響。

5. 消化結束后，輕輕敲擊培養(yǎng)皿，使細胞與皿底部脫離，依照常規(guī)操作進行細胞計數和傳代。

【注】：不需另做清洗和酶活終止步驟。

保存條件

冰袋運輸。收到后請于-20 ℃保存，有效期2年。2~8 ℃保存，有效期2個月。

注意事項

1. Accutase™融化后4℃保存，至少2個月穩(wěn)定。不可室溫保存。也可分裝成單次用量，放到-80 ℃凍存，有效期2年。

2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

3. 本產品主要用于科研領域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

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上海起發(fā)生物始終秉承創(chuàng)新，致力突破，堅持從技術源頭開始研發(fā)，依托自主核心技術，搭建自主可控的關鍵共性技術平臺，可快速、高效、規(guī)模化地進行產品開發(fā)，現有百余種基因工程重組酶和千余種高性能抗原抗體對等免疫診斷關鍵原料，擁有專項整套mRNA核酸藥物研發(fā)核心原料。此外，預計每年將以數千計的上新速度開發(fā)終端產品，廣泛滿足于生物醫(yī)藥產業(yè)工業(yè)化生產，科學研究、體外診斷、疫苗研發(fā)和動物檢疫等領域。

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